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H輔酶ⅠNAD測試劑盒可見分光光度法

產品簡介

H輔酶ⅠNAD測試劑盒可見分光光度法公司*的商品:CCAAT增強子結合蛋白α(CEBPα)重組蛋白Recombinant CCAAT/Enhancer Binding Protein Alpha (CEBPa)CCAAT增強子結合蛋白β(CEBPβ)重組蛋白Recombinant CCAAT/Enhancer Binding Protein Beta (CEBPb)CD200受體

更新時間:2022-05-19
訪問次數:1451
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產品名稱:H輔酶ⅠNAD測試劑盒可見分光光度法
產品規格:50管/24樣
檢測方法:可見分光光度法
產品貨號:LZ-01322S

產品分類:輔酶Ⅰ系列
商品介紹:

測定意義
輔酶ⅠNAD(H)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養細胞中,NAD+是糖酵解(EMP)和三羧酸循環(TCA)的主要氫受體,生成的NADH經呼吸電子鏈(ETC)傳遞把電子交給氧,在合成ATP的同時,形成大量的ROS,同時NADH再生為NAD+。糖、脂、蛋白質三大代謝物質分解中的氧化反應絕大部分通過這一體系完成。NAD(H)含量和NADH/NAD+比值的高低可用于評價糖酵解和TCA循環的強弱。較高的NAD(H)及NADH/NAD+比值說明細胞呼吸耗氧量較高,處于過氧化狀態。此外,NADH/NAD+比值升高也可抑制糖酵解和TCA循環。另外,NAD+降解產物對細胞信號傳導、代謝和基因表達等具有重要的調控作用。
測定原理
分別用酸性和堿性提取液提取樣品中NAD+和NADH,NADH通過PMS的遞氫作用,還原氧化型噻唑藍(MTT)為甲瓚,在570nm下檢測吸光值;而NAD+可被乙醇脫氫酶還原為NADH,進一步采用MTT還原法檢測。
需自備的儀器和用品
可見分光光度計、臺式離心機、移液器、1 mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

樣品制備:
1). 直接或稀釋使用清亮無色中性液體樣品,體積可達2.000ml。
2). 過濾混濁溶液。
3). 除去樣品中的CO 2 (果糖含量測試盒說明書過過濾)。
4 ). 果糖含量測試盒說明書過加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調至8.0。
5 ). 調整酸性淺色樣品的PH值至8.0,孵育約15分鐘。
6 ). 用空白樣品做對照測定有色樣品(如有必要調整PH值至8.0)。
7 ). 用PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺處理深色未經稀釋或體積更大的樣品。
8 ). 壓碎、攪勻固體或半固體樣品,用水溶解提取。
9 ). 用Carrez試劑將含有蛋白質的樣品去蛋白。
10).含脂肪的樣品用熱水提取。
QQ截圖20220307153443.png

特點為:
(1)應用廣泛
由于各種各樣的無機物和有機物在紫外可見區都有吸收,因此均可借此法加以測定。到目前為止,幾乎化學元素周期表上的所有元素(除少數放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。
(2)靈敏度高
由于相應學科的發展,使新的有機顯色劑的合成和研究取得可喜的進展,從而對元素測定的靈敏度大大提高了一步。特別是由于多元絡合物和各種表面活性劑的應用研究,使許多元素的摩爾吸光系數由原來的幾萬提高到幾十萬。相對于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和準確度一致*是比較高的。不但在實際工作中光度法被廣泛采用,在標準參考物質的研制中,它更受重視,很多光度分析法已制定成為標準方法。
(3)選擇性好
目前已有些元素只要利用控制適當的顯色條件就可直接進行光度法測定,如鈷、鈾、鎳、銅、銀、鐵等元素的測定,已有比較滿意的方法了。
(4)準確度高
對于一般的分光光度法來說,其濃度測量的相對誤差在1-3%范圍內,如采用示差分光度法測量,則誤差往往可減少到千分之幾。
(5)適用濃度范圍廣
可從常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(經預富集后)。
(6)分析成本低、操作簡便、快速。

Apelin     脂肪炎癥因子Apelin抗體    

ATP4B     氫鉀ATP酶通道蛋白抗體    

ATP5A     ATP5A抗體    

Arg3.1     即刻早期基因ARC抗體    

ARF6     ADP核糖基化因子6抗體    

Aromatase     芳香化酶抗體    

Artemin     Artemin抗體    

ADRA1A     alpha 1腎上腺素能受體A抗體    

Angiotensin II Type 1 Receptor     血管緊張素Ⅱ-1型受體抗體    

ATF3     活化轉錄因子3抗體    

APJ Receptor     血管緊縮素樣蛋白1抗體    

APG7     自噬相關蛋白7抗體    

ANTXR2     炭疽毒素受體2抗體    

ATG4C     自噬相關蛋白4C抗體    

APG5L     自噬蛋白5/細胞凋亡的特異性蛋白抗體    

ARSA     芳基硫酸酯酶A抗體    

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單脫氫抗壞血酸還原酶(MDHAR)測試盒     MDHAR單脫氫抗壞血酸還原酶測試劑盒微量法     微量法    

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甲醛脫氫酶(FDH)測試盒     FDH甲醛脫氫酶測試劑盒微量法     微量法    

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操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
3. 樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入終止液50μL,15min內,在450nm波長處測定各孔的OD值。

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